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以往研讨多依据16S rRNA基因测序,其分辨率一般仅能到达属或科水平,束缚了对根瘤菌多样性的知道。本研讨选用rpoB基因(RNA聚合酶β亚基编码基因)高通量测序技能,该基因具有物种和株系水平的系统发育分辨率,可供给更高精度的分类学信息。
研讨团队经过整合3篇已宣布论文中rpoB基因高通量测序数据,对135个样本做了跨区域元剖析,提醒了豆科植物根际根瘤菌群落的生物地舆格式及其要害驱动因子。PCoA成果剖析显现,根瘤菌属的OTUs在根际中没有表现出与特定宿主植物的明显相关,标明严厉的宿主特异性过滤可能是根和根瘤生态位的特征,而非根际。相反,样本的涣散首要受地舆别离解说:来自西北我国(甘肃和青海)和西藏的样本集合在一起,不管宿主植物为何,这些样本坐落PCoA1的右侧(解说总方差的5.31%)。PERMANOVA剖析辨认出土壤pH(F₁,₁₀₂ = 3.69, P 0.001)和经度(F₁,₁₀₂ = 3.70, P 0.001)为根瘤菌群落变异的最强猜测因子。进一步的PCoA剖析依据成果得出经度与土壤pH呈负相关。
该元剖析标明,根瘤菌群落在区域尺度上受土壤化学性质(如pH、营养)和空间梯度(经度、纬度)一起刻画,尤其是pH和经度。这一发现为猜测根瘤菌对环境改变的呼应供给了根底。依据元剖析成果,研讨选取了三种不同pH布景的土壤:江西酸性土(pH 5.78)、山东中性偏酸土(pH 6.21)和西藏碱性土(pH 8.45)。每种土壤设置三种pH处理:酸化(HCl)、碱化(NaOH)和对照(H₂O)。栽培三种豆科植物:苜蓿、蚕豆和大豆。期间定时洒水。9周后后搜集根际土壤和根瘤样本,进行rpoB基因扩增子测序和根瘤菌株分类。经过操控试验,发现在江西酸性土、山东中性土和西藏碱性土三种不同pH布景的土壤中,酸碱双向调理均能进步根瘤菌的根瘤占有率。详细表现为:对酸性土壤进行碱化处理或对碱性土壤进行酸化处理,这种中和效应明显地增强了根瘤菌的定殖才能。
网络剖析标明,酸化和碱化处理均减少了共现网络的均匀度,简化了群落结构。iCAMP剖析发现,pH改变促进了根瘤菌群落确实定性拼装进程。详细而言,pH改变经过挑选性富集pH专性类群加强了确定性挑选:酸性条件下富集慢生根瘤菌属,碱性条件下富集根瘤菌属和中慢生根瘤菌属。进一步的CAP剖析(束缚主坐标剖析)发现了从根际到根瘤的区室化改变:根瘤菌群落对土壤来历和pH改变的敏感性逐步削弱,而对宿主挑选的呼应增强。